Новости

В зависимости от разницы в определении антигенов и антител существует множество автоматических режимов измерения ИФА, таких как прямой метод, косвенный метод, метод двойного сэндвича антител (прямой, косвенный), метод конкурентного ингибирования (прямой, сэндвич и т. Д.), Метод захвата и т. Д. В клинических лабораториях, Обыкновенно используемые режимы измерения ЭЛИСА включают двойной метод сэндвича антитела, косвенный метод, двойной метод сэндвича антигена, конкурсный метод ингибитирования и метод захвата.

При определении антигенов наиболее часто используемым способом определения антигенов макромолекулы белка является метод двойного сэндвича антител. Для малых молекул только с одним эпитопом используется метод конкурентного ингибирования; определение антител обычно использует косвенный метод, метод двойного сэндвича антигена, метод конкурентного ингибирования и метод захвата.

1. Двойной метод сэндвича антитела рабочего места ЭЛИСА

For macromolecular proteins containing multiple epitopes, the Рабочая станция elisa uses the double antibody sandwich method to determine it is quite simple. The existing commercial kits for measuring protein antigens basically all adopt this measuring mode.

The first full-automatic ELISA kits for double-antibody sandwich detection of antigens all adopted the "two-step method." Later, in order to shorten the detection time and simplify the operation steps, reagent manufacturers gradually introduced the "one-step" Набор для медицинских анализов.

В настоящее время в нашей клинической лаборатории определение макромолекулярных антигенов, таких как HBsAg, альфа-фетопротеин (α-фетопротеин, αFP), специфический антиген простаты (PSA), маркеры серии CA, ХГЧ и гормоны и т. Д. В основном используют одноэтапный метод. По сравнению с двухшаговым методом, одношаговый метод прост в эксплуатации, но имеет свои недостатки. Если с ним не обращаться должным образом, результаты иммуноанализа сэндвича с двойным антителом будут ложноотрицательными или низкими количественными результатами из-за существования эффекта крючка.

2. Конкурентный тест права рабочей станции ELISA

Small molecule haptens such as digoxin, theophylline and other drugs and hormones such as T3, T4, and testosterone may have only one epitope. Or because the molecule is too small, after binding to one antibody, it cannot bind to another antibody due to steric hindrance, so the double-antibody sandwich method cannot be used for measurement. The Рабочая станция elisa can only use the competitive inhibition method.

В этом режиме анализа необходимо получить комбинацию малых молекул и ферментов. Подготовка ферментных конъюгатов малых молекул не так проста, как у ферментных конъюгатов антител, и ее очистка также довольно сложна. Разница молекулярных масс между малым связанным с молекулой ферментом и свободным ферментом невелика, и ее трудно разделить с помощью общих методов молекулярного сита. Поэтому некоторые люди пытаются установить двойную конкуренцию сэндвич-антител методом ELISA для определения малых молекул на основе синтеза ди-или мультимерных малых молекул. Чувствительность и специфичность определения были улучшены.

3. Косвенный метод определения антител на рабочей станции ИФА

Measure the antibodies produced by the body against pathogen antigens of infectious diseases, and the same is true for the Набор для анализа антител. До того, как трудно получить высокочистые и четко определенные антигены, или когда антигены являются более сложными, обычно используется косвенный метод.

В настоящее время широко используемыми клиническими тестами антител к вирусу гепатита С (анти-HCV) являются все косвенные методы, а косвенный метод используется для обнаружения антител. Строго говоря, измеряется только класс антител IgG, а классы IgM и IgA не участвуют. Это определяется с помощью меченного ферментом вторичного антитела. В настоящее время некоторые специфические наборы обнаружения антител IgⅢ используют косвенный метод.

4. Двойной метод сэндвича антигена рабочего места ЭЛИСА

The antibodies measured by the double antigen sandwich method include all types of specific antibodies, and are not interfered by non-specific IgG. Therefore, the sensitivity and specificity of the double antigen sandwich method to detect antibodies are higher than the indirect method. At present, in order to improve the sensitivity of antibody determination, the kit of the Рабочая станция elisa has basically adopted the double-antigen sandwich method, except that anti-HCV is more complicated due to its antigen.

5. Закон о конкуренции рабочей станции ELISA

The determination of antibodies generally does not use a competition method. When the impurities in the antigen are difficult to remove or the binding specificity of the antigen is unstable, the Рабочая станция elisa can use this mode to determine antibodies. The most typical example is the determination of hepatitis B virus core antibody (HBcAb) and hepatitis B virus e antibody (HBeAb).